在RNA的提取實驗中多由手工操作。 離心機是本次實驗必須要用的設備，還有賽多利斯移液器。文中，上海安亭科學儀器廠就實際操作中的注意事項和大家分享，先分析在實驗過程中需要注意的事項。
上海安亭科學儀器廠在文中介紹實驗過程需要注意事項,文中所用的離心機是上海安亭TDL-20bR高速冷凍離心機：
（1）采取水泡皮、水泡液、血液 （抗凝血）、血清、組織、細胞培養物和口腔分泌物等樣品時，取樣的器材必須經高壓或者干熱滅菌。分離后的樣品在2～8℃條件下保存不能超過24h，-70℃可長期保存，但不能反復凍融3次。
（2）除裂解液4℃保存外，氯仿、異丙醇、75%乙醇在-20℃預冷。試驗需在生物安全柜中進行，每份樣本（1.5ml滅菌離心管）中加入600μl裂解液、200μl待測樣本，再加入200μl氯仿，用手顛倒混勻。置于冷凍離心機中于4℃中12000轉離心15min。在樣品數量較多時，為了避免加樣順序錯誤，可以使移液頭和樣品的位置一對應，還可以使離心管的管蓋略偏向一邊，加完一份樣品之后把管蓋撥向另一邊。
（3）上清液相轉移到對應的離心管時，可把離心管略微傾斜，在移液頭接觸到上清液面后，緩抬持移液器手的拇指，同時將移液器向下深入，當移液頭快接觸到中間層時停止，眼睛盯住移液頭的尖部，如果發現有白色絮狀物進入，拇指輕壓將其推出，然后停止吸液，這樣可以保證吸取液體中不含DNA和蛋白質，所有樣品轉移完成后切記顛倒混勻。
（4）每一步離心時要注意固定離心管的方向，通常將離心管開口朝向上海安亭離心機轉軸方向放置，這樣產生的核酸會位于離心管底部靠后的一側，方便后面吸干殘液。
（5）在倒去上清倒置于吸水紙時，吸水紙要有一定的厚度，防止液體滲透到試驗臺上，污染其他樣品，也不要在一張紙上放置過多樣品，防止不小心碰倒離心管時，樣品互相污染。用微量加樣器吸干殘液時不要碰倒離心管后部有沉淀的一面，每份樣品更換吸頭。在室溫下干燥時間不宜過長，否則會導致RNA不溶于DEPC水。
（6）實驗過程中產生的吸頭應直接打入盛有10%次氯酸鈉的廢物缸內，并與其他廢棄物品一同交由處理醫療廢棄物的專業人員處理 。工作臺及各種實驗用品經常用10%次氯酸鈉 、75%酒精和紫外燈進行消毒。
以上就是總結的一點經驗，以上內容僅供大家參考。
掃一掃進入手機官網
掃一掃關注我們
