1、上海安亭科學(xué)儀器廠介紹本次實(shí)驗(yàn)需要的材料與儀器
豬CS111014-01( Mw=17.5kDa，華懋雙匯實(shí)業(yè)( 集團(tuán)) 有限公司生物化學(xué)制藥廠) ；低分子量豬( Mw=4.1kDa，自制) ；Dox.HCl( 97% ，北京偶合試劑有限公司) ，CS-Dox( 自制) ，乙二胺四乙酸二鈉( 分析純，國藥試劑有限公司) 。其他試劑均為國產(chǎn)分析純。
實(shí)驗(yàn)儀器：上海安亭科學(xué)儀器廠TDL-40B臺(tái)式低速離心機(jī)，Cary Eclipse熒光分光光度計(jì)( 美國Varian公司) ，TF-FD-1冷凍干燥機(jī)( 上海田楓實(shí)業(yè)有限公司) ，VortexQL-902渦旋儀( 江蘇海門其林貝爾儀器制造有限公司) 。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SD 大鼠( 雄性，200 ± 20 g) ，購買于濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司。
2 、上海安亭離心機(jī)分析大鼠血漿的實(shí)驗(yàn)方法
檢測條件的選擇：選用熒光分光光度法測量血漿中Dox的含量。 Ex480nm，Em500-800nm掃描，可以得到在Em593nm處有較高峰，故本實(shí)驗(yàn)檢測條件選用Ex480nm，Em593nm，激發(fā)與發(fā)射狹縫均設(shè)定為10nm。
空白血漿樣品的采集：實(shí)驗(yàn)前SD大鼠禁食不禁水12h，實(shí)驗(yàn)大鼠乙醚麻醉，眼內(nèi)眥取血，采集的空白血液標(biāo)本放入到上海安亭科學(xué)儀器廠裝有EDTA二鈉的離心管中，置于上海安亭TDL-40B臺(tái)式低速離心機(jī)中以3000r/min離心10min，取上清，即得空白血漿樣品。
Dox溶液的配制：精密稱取 Dox·HCl 1.25mg加水定容到25ml的容量瓶中，配制50μg/ml的Dox溶液作為儲(chǔ)備液。精密吸取儲(chǔ)備液( 0.04ml、0.10ml、0.20ml、 0.40ml、1.00ml、2.00 ml、4.00 ml、6.00ml) 放入10ml容量瓶中加水定容，配制相應(yīng)濃度( 0.2μg /ml、 0.5μg/ml、1、2μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml) 的Dox溶液，4℃避光保存待用。
Dox標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密吸取8份大鼠空白血漿 200μl放入上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)的離心機(jī)需用的1.5ml離心管中，每個(gè)離心管中分別加入不同濃度的鹽Dox溶液200μl，渦旋混勻，使得血漿中Dox的濃度分別為0.1μg/ml、0.25μg/ml、0.50μg /ml、1.00μg /ml。在檢測條件下測定熒光強(qiáng)度值。以溶液濃度為橫坐標(biāo)，最終熒光強(qiáng)度值( Y)為縱坐標(biāo)，繪出其熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線并求得工作曲線的回歸方程。
以上內(nèi)容僅供大家參考，歡迎大家咨詢購買上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)的離心機(jī)。
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